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細(xì)胞生物學(xué)
細(xì)胞增殖與毒性
AC11L101CFDA, SE 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
CFDA-SE分子式為C29H19*,分子量為557.47,CAS號(hào)為150347-59-4,CFDA SE英文名是Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,CCFDA, SE 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針可用于細(xì)胞示蹤,也可用于細(xì)胞增殖檢測(cè)。
產(chǎn)品分類(lèi)
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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | AC11L101 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 25mg | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | CFDA-SE分子式為C29H19NO11,分子量為557.47,CAS號(hào)為15 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
CFDA-SE分子式為C29H19NO11,分子量為557.47,CAS號(hào)為150347-59-4,CFDA-SE英文名是Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,CFDA-SE可用于細(xì)胞示蹤,也可用于細(xì)胞增殖檢測(cè)。CFDA SE可以通過(guò)完好的細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE。CFSE可以隨機(jī)地、不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的賴(lài)氨酸殘基(Lysine)或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24 h,即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,標(biāo)記時(shí)間可達(dá)數(shù)個(gè)月。
CFDA-SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488 nm激發(fā),發(fā)射波長(zhǎng)為518 nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 檢測(cè)通道。除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外,還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
CFDA-SE標(biāo)記的分裂細(xì)胞每分裂一次,子代細(xì)胞的熒光會(huì)減弱一半,這樣通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)就可以檢測(cè)出沒(méi)有分裂的細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞熒光強(qiáng)度減半(1/2),分離兩次的細(xì)胞熒光強(qiáng)度再減半(1/4),以此類(lèi)推,熒光強(qiáng)度按照1/2,1/4,1/8,1/16的規(guī)律逐漸遞減。采用CFDA-SE通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)獲得的檢測(cè)結(jié)果每一個(gè)峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞,從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后,分裂0次或1次等沒(méi)有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會(huì)逐漸減少直至檢測(cè)不到。CFSA-SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA-SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA-SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可用于成纖維細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞,造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。CFDA-SE如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。我們的CFDA SE探針產(chǎn)品以25mg粉末包裝的形式提供。
常用名 | CFDA-SE | ||
中文名稱(chēng) | 5(6)-羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯 | ||
英文名稱(chēng) | 5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester; CFDA-SE | ||
CAS# | 150347-59-4 | 分子式 | C29H19NO11 |
分子量 | 557.46 | 純度 | ≥95%(HPLC) |
Ex(nm) | 494 | Em(nm) | 521 |
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
CFDA, SE 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針 | AC11L101 | 25 mg |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光干燥保存,有效期24個(gè)月。【注】:避免反復(fù)凍融。
使用方法
1. 保存液配制(5 mM)
按需配制,如取DMSO 360 μL,溶解1 mg CFSE,超音波溶解,得到5 mM CFSE保存液,將其按40 μL體積分裝于避光的無(wú)菌凍存管中,-20℃可保存2個(gè)月。【注】:CFSE遇水容易分解,所以在配置時(shí)候要用無(wú)水DMSO,配置后計(jì)算用量盡快使用,多余的立刻避光保存-20℃。DMSO是有機(jī)溶劑,對(duì)于蛋白質(zhì)會(huì)有損傷,所以在配置的時(shí)候DMSO用量越少越好。
2. 工作液配制
取5 mM的CFSE稀釋液1 μL,加入1 mL 10%FCS 的PBS稀釋。
3. 染色
(1) 重懸細(xì)胞。用有5% FCS的PBS重懸細(xì)胞,細(xì)胞濃度一般為1x1x106/mL (體外實(shí)驗(yàn))或1x1x107/mL(轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn))。
(2) 染色。1mL DFSE工作液與1mL細(xì)胞懸液混合后37℃孵育5~10 min。期間輕輕混勻2次(用手輕彈管壁,切忌吹打)。
(3) 終止染色。用培養(yǎng)液洗滌3次并離心。一般在第2次洗滌后再孵育5 min后進(jìn)行第3次洗滌。冰冷的含10% 新生牛血清、RPMI-1640 medium(含L-谷氨酰胺)(貨號(hào):AC01L064)(先加入1 mL混勻,然后續(xù)加入7 mL),輕輕混勻1 min(用手輕彈,切忌吹打),1500 r/min 離心5 min。
(4) 流式細(xì)胞儀在FL1通道檢測(cè)。
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