紅細(xì)胞裂解液的原理說明與使用方法

紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡(jiǎn)便易行的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。

原理說明

利用細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異，形成滲透壓差，外部的水分會(huì)擴(kuò)散至細(xì)胞內(nèi)，使紅細(xì)胞膨脹，達(dá)到裂解的效果。

使用方法

1.裂解紅細(xì)胞

(1) 向 1 份待裂解的新鮮全血中加入 3 倍體積的紅細(xì)胞裂解液（如 1mL 新鮮全血加入 3mL 紅細(xì)胞裂解液）輕輕渦旋或顛倒混勻。【注】：如果對(duì)新鮮組織細(xì)胞進(jìn)行處理需經(jīng)胰酶等消化成單個(gè)細(xì)胞懸液后離心收集細(xì)胞后再進(jìn)行后續(xù)操作。

(2) 冰上孵育 15 min,其間輕輕渦旋混勻 2 次。【注】：紅細(xì)胞裂解后,溶液應(yīng)該是清亮透明的。

2.收集白細(xì)胞

(1)在 4℃，450×g 離心 10 min 收集白細(xì)胞，小心吸棄上清液。

(2) 向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕渦旋充分重懸白細(xì)胞（例如起始血液為 1 mL，則加入 2 mL 的紅細(xì)胞裂解液）。

(3) 在 4℃，450×g 離心 10 min 收集白細(xì)胞，小心并吸去上清液。

(4) 重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。【注】：如提取 RNA，最好從此步開始使用無 RNase 的溶液進(jìn)行。

紅細(xì)胞裂解液產(chǎn)品

[名稱] 李記生物

[名稱] 紅細(xì)胞裂解液

[貨號(hào)] AP01L106

[規(guī)格]  100mL