介紹重組腸激酶的使用注意事項(xiàng)

　　重組腸激酶（Enterokinase,lightchain）是一種高度專一性識(shí)別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐让福部梢詫в羞@個(gè)識(shí)別序列的融合蛋白切開。由于腸激酶具有高度專一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。

　　腸激酶具有高度專一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。本重組表達(dá)產(chǎn)品攜帶his標(biāo)簽，便于切割目標(biāo)蛋白后除去，保證酶切的可控性和特異性。

　　重組腸激酶的注意事項(xiàng)

　　在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影響。可參照以下推薦方法進(jìn)行酶切：

　　1、為獲得理想酶切結(jié)果，請將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中，再進(jìn)行酶切。

　　2、若不便透析，可將樣品稀釋，咪唑含量在100mM以下，NaCl濃度在50mM以下，甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即1U酶切500µg蛋白）。

　　3、如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長酶切時(shí)間，也可達(dá)到較好酶切效果。