DNA定量試劑盒的檢測規(guī)程

更新時間：2017-07-04

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DNA定量試劑盒結(jié)果判斷，如果Ct值＝40，則實驗樣品的UU DNA含量（基因拷貝數(shù)/ml）＜1×103。如果Ct值＜40，則實驗樣品的UU DNA含量（基因拷貝數(shù)/ml）＝ M。檢測樣本中核酸陽性時，按實際結(jié)果報告；對可疑結(jié)果應復查，需要時與臨床。注意事項，各標本沸水浴時間誤差不超過1分鐘。加樣時每加完一個要立即蓋上封閉好離心管。

DNA定量試劑盒操作時，須戴手套。使用新鮮配制的染色工作液，務必不要超過 2 小時，且注意避光。建議使用塑料管配制染色工作液，而不是玻璃制品。孵育時，避免光照。系統(tǒng)檢測，標準曲線測定 1 次即可；如果儀器更換，則需要重新測定 1 次。如果熒光讀數(shù)過高，可以相應稀釋樣品量。可以使用熒光酶標儀檢測，試劑用量和體系均除以 5，包括標準 DNA 含量，其計算公式[根據(jù)標準曲線獲得樣品對應DNA 濃度（微克）X樣品稀釋倍數(shù)]÷0.1（樣品容量；毫升）＝微克/毫升。鹽類、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白、瓊脂糖、單鏈 DNA 和 RNA 不會干擾檢測。

DNA定量試劑盒關(guān)閉擴增儀蓋，按儀器操作規(guī)程開始循環(huán)。擴增結(jié)束后關(guān)閉擴增儀電源，取出PCR反應管，密封放入垃圾桶。產(chǎn)物分析，條件設置：反應結(jié)束后自動保存檢測數(shù)據(jù)文件，調(diào)整熒光數(shù)值為F1/F2。點擊Quantification讀取結(jié)果。基線的確定：取3～8個循環(huán)的熒光信號。